Las marcas del grupo Absolute Biotech, distribuidas por Abyntek Biopharma en España y Portugal, han desarrollado una nueva pareja de anticuerpos compatibles con ELISA para la investigación de SARS-COV-2.
El grupo Absolute Biotech combina la experiencia en anticuerpos recombinantes de Absolute Antibody y su sólido catálogo de anticuerpos anti-coronavirus, con la experiencia de Everest en anticuerpos policlonales de cabra, para proporcionar anticuerpos que han sido seleccionados individualmente por su desempeño en la detección de proteínas spike SARS-CoV-2. La pareja de anticuerpos permite a los investigadores beneficiarse de la fiabilidad de los anticuerpos policlonales de cabra como anticuerpo de captura, y de la especificidad y la calidad de señal de los anticuerpos recombinantes diseñados para la detección.
La nueva referencia (EB-PAIR-001-HRP) presenta el anticuerpo de cabra de Everest (EB13088) que captura del dominio S1 (terminal N) de la proteína spike anti-SARS-CoV-2 y el anticuerpo recombinante de glicoproteína spike (Ab01680-10.0) en formato IgG1 humano anti-COVID-19 y SARS-CoV de Absolute Antibody.
El anticuerpo recombinante se utilizó ampliamente durante la pandemia de coronavirus para evaluar el potencial tanto de la terapia mono- como la combinada, así como para controles serológicos en ensayos de diagnóstico de COVID-19; (Figura 1). El anticuerpo policlonal de cabra se utilizó durante la pandemia para diversas aplicaciones de investigación de COVID-19; Tal y como muestra la Figura 2 en el análisis de inmunofluorescencia de células HEK293 infectadas con el plásmido que expresa la proteína de pico del SARS-CoV-2.
Figura 1. Curva de unión del anticuerpo CR3022 (Ab01680-10.0) de la glicoproteína anti-COVID-19 y SARS-CoV S a los dominios S1 y S2 de la glicoproteína Spike del SARS-CoV-2 de diversos orígenes
Placa ELISA recubierta con glicoproteína Spike del SARS-CoV-2 (S1), His-Tag (células de insectos; línea gris), glicoproteína Spike del SARS-CoV-2 (S2), His-Tag (células de insectos; línea amarilla) y coronavirus del SARS Spike Glycoprotein (S1), His-Tag (células HEK293; línea azul) (The Native Antigen Company) en concentraciones de 5 µg/ml. Se realizó una dilución en serie de 3 veces a partir de 41,6 ng/ml usando Ab01680-10.0. Para la detección, se utilizó una dilución 1:4000 de anticuerpo anti-IgG humana marcado con HRP.
Juntos, los anticuerpos le permiten detectar el SARS-CoV-2 con confianza. La Figura 3 demuestra la curva de unión de ambos anticuerpos en presencia de concentraciones de antígeno crecientes.
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¿Por qué recurrir a esta combinación?
Desde su creación en el año 2000, en Everest Biotech se han convertido en expertos en anticuerpos policlonales de cabra purificados por afinidad de antígeno. Los anticuerpos policlonales tienen una mayor afinidad general debido a su capacidad para unirse a múltiples epítopos. Esto hace que el uso de un anticuerpo policlonal sea ventajoso como anticuerpo de captura en ELISA porque amplía efectivamente la red de posibles antígenos que el anticuerpo inmoviliza en su ELISA.
Posteriormente, el anticuerpo de detección recombinante utiliza su especificidad de antígeno totalmente definida para limitar los resultados positivos en su ensayo, dejándole datos limpios y claros en los que puede confiar.
Figura 2.EB13088 Análisis de inmunofluorescencia de células HEK293 fijadas con paraformaldehído transfectadas transitoriamente con plásmido que expresa la proteína de pico del SARS-CoV-2, permeabilizado con Tritón al 0,15%. Incubación primaria 1 hora (10 ug/ml) seguida de anticuerpo secundario Alexa Fluor 488 (2 ug/ml), que muestra tinción de membrana y citoplasma. La tinción nuclear es DAPI (azul). Control negativo: células HEK293 no transfectadas.
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Reactivos para la investigación contra el covid
El clon del anticuerpo monoclonal humano CR3022 se describió por primera vez en 2006 como una terapia potencial para la infección aguda por SARS-CoV. Posteriormente, a principios de 2020, se descubrió que CR3022 se une potentemente al SARS-CoV-2, no solo al SARS-CoV, lo que sugiere su eficacia como herramienta de diagnóstico y posible tratamiento.
En respuesta a estos hallazgos, los cientificos de Absolute Antibody han producido CR3022 de forma recombinante en una variedad de formatos, incluidos fragmentos humanos de IgG1, IgG2, IgG3, IgA, IgM, Fab y Fab2, muchos de ellos con regiones Fc modificadas para funciones efectoras personalizadas. Disponer de innumerables opciones de anticuerpos humanos puede permitir a los investigadores imitar con mayor precisión las respuestas de anticuerpos observadas en las infecciones por COVID-19.
Figura 3. EB-Pair-001-HRP. Antígeno: proteína Spike S1 recombinante (2000 ng/ml, 1000 ng/ml, 500 ng/ml, 250 ng/ml, 125 ng/ml, 62,5 ng/ml, 31,25 ng/ml, 0 ng/ml). Bloqueo con BSA al 3% durante 2 horas.
Además, el grupo Absolute también dispone del clon CR3022 en varios isotipos de ratón, conejo, gato y hurón para obtener una paleta más completa de herramientas de investigación del coronavirus.
El clon CR3022 y el par de anticuerpos COVID compatibles son solo dos de las herramientas de investigación de COVID que ponemos a disposición del investigador. El grupo Absolute ofrece una variedad de reactivos de coronavirus recombinantes para respaldar la investigación y el diagnóstico de COVID-19.
Todos los anticuerpos se han diseñado en diferentes isotipos y subtipos humanos, así como en otras especies, fragmentos y dominios Fc diseñados. Los reactivos disponibles incluyen:
- Anticuerpos Spike contra glicoproteínas y nucleoproteínas (CR3022, CR3009 y CR3018)
- Anticuerpos neutralizantes derivados de pacientes COVID-19 (CV1 y CV30)
- Aglutinantes anti-RBD generados originalmente como nanocuerpos sintéticos
- Proteínas de fusión ACE2 Fc
Además, el resto de empresas del grupo Absolute Biotech ofrecen una amplia gama de productos para la investigación sobre el SARS-CoV-2 y temas relacionados. Explora cómo los anticuerpos anti-dsRNA SCICONS™ de otras marcas de Absolute Biotech ayudaron en la lucha contra el COVID-19 y explora toda la gama de reactivos relacionados con el coronavirus de Kerafast y LSBio.
Absolute Biotech une seis empresas innovadoras de servicios y reactivos de investigación en una sola organización, y este nuevo paquete de productos es la manera perfecta de mostrar nuestras capacidades combinadas mediante la creación de ELISA que funcionen mejor para los investigadores.
