Este protocolo de inmunohistoquímica describe los pasos para realizar una tinción de inmunohistoquímica con secciones de tejido incluidas en parafina.
La inmunohistoquímica (IHC) es un método para demostrar la presencia y ubicación de proteínas dentro de las células y en el contexto de los tejidos. En este experimento, un anticuerpo primario se une específicamente a una proteína de interés presente en un tejido.
Los sistemas de detección cromogénicos o fluorescentes permiten visualizar la interacción anticuerpo-antígeno. En la detección cromogénica, una enzima conjugada con el anticuerpo escinde un sustrato para producir un precipitado coloreado en la ubicación de la proteína, mientras que, en la detección fluorescente, se conjuga un fluoróforo con el anticuerpo y se puede visualizar mediante microscopía de fluorescencia.
IHC-P se refiere a la tinción de tejidos que se fijaron en formalina tamponada neutra y luego se incluyeron en parafina antes de seccionarlos. Este inmunoensayo es especialmente útil en el diagnóstico para determinar anomalías morfológicas y la presencia de biomarcadores indicativos de la progresión de enfermedades como el cáncer.
El protocolo general de Inmunohistoquímica contiene:
- Materiales y reactivos
- Fijación e inclusión del tejido
- Cortar y montar la sección
- Desparafinización y rehidratación
- Recuperación de antigenos
- Tinción inmunohistoquímica
- Contratinción
- Deshidratación y estabilización con medio de montaje
- Problemas y Soluciones
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